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本文標(biāo)題:"流式細(xì)胞儀是以顯微鏡技術(shù)為基礎(chǔ)的儀器"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過-----時(shí)間:2012-12-14 0:41:54

流式細(xì)胞技術(shù)簡(jiǎn)介

 
流式細(xì)胞儀是以顯微鏡技術(shù)、血球計(jì)數(shù)儀、噴墨技術(shù)為三大基礎(chǔ)發(fā)展出的儀器,主要由液流系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、 電子系統(tǒng)所組成。原理為利用鞘液(Sheath Fluid)流通過程中,加壓使樣品分析管中的細(xì)胞懸浮液循采樣管經(jīng)管路進(jìn)入液流腔(Flow Chamber),由于管徑縮減,形成流體動(dòng)力聚焦(Hydrodynamic Focusing),讓細(xì)胞或懸浮粒成為單顆排列,依序通過打在分析槽(Flow Cell)上的雷射。由于細(xì)胞的大小及內(nèi)容物會(huì)對(duì)雷射光造成散射,并且,雷射能夠激發(fā)標(biāo)定于細(xì)胞上的螢光物質(zhì),因此能藉由收集前散射光(FS)、側(cè)散射光(SS)、螢光(FL)的光學(xué)訊號(hào),轉(zhuǎn)換為電子訊號(hào),加以分析而得知樣品中的細(xì)胞類型及特性
 
  流式分析圖表以柱型圖(Histogram)及點(diǎn)圖(Dot Plot)為主。使用柱型圖時(shí)需先指定 X 軸顯示項(xiàng)目,例如螢光強(qiáng)度(FL intensity),Y 軸則顯示相對(duì)應(yīng)于不同訊號(hào)強(qiáng)度的顆粒數(shù)(events);使用點(diǎn)圖則 X、Y 軸均需指定,例如 X 軸顯示前散射光強(qiáng)度(FS integral)、Y 軸顯示側(cè)散射光強(qiáng)度(SS log)。不論是柱型圖或點(diǎn)圖,均可界定或圈選細(xì)胞群,針對(duì)特定細(xì)胞群做進(jìn)一步分析。完成分析后,可圈選出欲分選的目標(biāo)細(xì)胞群。
 
 
 
  除了分析之外,流式細(xì)胞分析分選儀的另一個(gè)主要功能即細(xì)胞分選(Sorting),能夠進(jìn)行細(xì)胞分選的液流腔必須結(jié)合有壓電或電磁轉(zhuǎn)換器(Piezoelectric Transducer or Electromagnetic Transducer),并須在分析時(shí)加上電極板。由于分選時(shí)仍需以雷射光偵測(cè)通過的細(xì)胞訊號(hào),便可知道目前通過的細(xì)胞是否落于欲分選的目標(biāo)群,同時(shí),利用壓電轉(zhuǎn)換器帶動(dòng)液流腔,藉振波原理使流通的水柱形成水珠,當(dāng)將振動(dòng)頻率、振幅調(diào)整至適當(dāng)大小時(shí),即可利用水珠攜帶如細(xì)胞之類的顆粒物質(zhì)。若通過的細(xì)胞落于欲分選的目標(biāo)群范圍,壓電轉(zhuǎn)換器即瞬間通電而使水帶電,因此水珠自水柱斷裂時(shí)帶有電荷,帶電荷的水珠由下方兩側(cè)分別帶正負(fù)電的電極板(Deflection Plates)引導(dǎo),落入兩側(cè)的樣品收集管中。利用讓水珠帶正電或負(fù)電,可決定其所攜帶的細(xì)胞要落入哪一側(cè)的樣品收集管,不帶電的水珠(非目標(biāo)細(xì)胞)則落入中央的收集管或廢液區(qū)。收集的細(xì)胞可供后續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)使用。
 
 
  流式細(xì)胞分析技術(shù)可應(yīng)用于細(xì)胞週期分析、基因組大小評(píng)估、核型分析(Karyotyping)和染色體分選、精細(xì)胞分析分選、微生物分析分選、鈣離子及膜電位分析、胞器分選、血液及骨髓細(xì)胞和淋巴細(xì)胞分析分選、癌癥研究、臨床檢驗(yàn)等方面。

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流式細(xì)胞儀是以顯微鏡技術(shù)為基礎(chǔ)的儀器,金相顯微鏡現(xiàn)貨供應(yīng)


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